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原子力显微镜成像技术显示NBM主要形成220 nm左右的纳米颗粒,没有明显的纤维网络结构,而NBM-cys和NBF能够自组装成长度分别为0.5 μm和7.5 μm左右的纳米纤维。因此,蛛丝蛋白的ADF3结构域不仅能够通过二硫键增加蛋白分子量,还能促进β-sheet结构的组装和排列。此外,Int-NBM能够组装成更长的纳米原纤维 (~70 μm),表明内含肽介导的聚合显著促进了蛋白的自组装动力学。随后,作者使用硫黄素-T (ThT) 荧光探针来评估β-sheet结构的含量和自组装效率。NBM蛋白的荧光强度最低,而Int-NBM蛋白的荧光强度最高,表明Int-NBM蛋白的β-sheet含量较高,自组装动力学速度较快。上述结果表明Int-NBM高效组装动力学赋予蛋白纤维丰富的β-sheet含量、有序的分子排列和更高的力学性能。