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SOS1 RNAi对盐芥耐盐Dogecoin狗狗币交易平台 - 狗狗币价格行情,实时走势图性的影响pdf

作者:小编2025-11-21 01:45:49

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  盐胁迫下,植物细胞的离子均衡受到破坏,胞质中积累过多的NA,对植物细胞的代谢产生毒害。植物细胞为适应胁迫环境,一方面积累可溶性有机物质;另一方面,则通过NA外排或者区隔化、并调整K/NA比率的机制来消除NA的毒害。拟南芥细胞内控制NA外排的基因SOS1及离子区隔化基因ATNHX1均已克隆,SOS1及ATNHX1在拟南芥中的过量表达显著提高了转基因植株的耐盐性。在拟南芥中,SOS1及SOS2、SOS3所组成的SOS信号通路的调控机制业已得到阐明,研究表明SOS信号通路在调控离子均衡和植物耐盐性中发挥重要作用。作为拟南芥近缘的盐生植物盐芥,短时间内能耐受高达500MMNACL的冲击,在盐适应前后既不产生盐腺也没有复杂的形态上的变化,表明其耐盐性很大程度上源于基本的生理和生化机制。因此在盐芥中沉默SOS1基因进行研究,对揭示盐生植物耐盐性的基础具有重要意义。本实验将盐芥编码NA/H逆向转运蛋白的SOS1基因721BP的片断反向重复构建到基因沉默载体PGSA1252中,导入农杆菌后,进行植物遗传转化,实现盐芥中SOS1的转录水平的下降。在用浓度为50PPM的GLUFOSINATEAMMONIUM筛选后,获得转基因株系,自交一代获得足够的转基因种子后,对其进行了分子生物学的验证及生理指标的检验。转基因植株的分子生物学检测如下1各转基因株系中,均能通过PCR扩增出BAR基因的500BP的特异性条带,表明TDNA已经携带BAR基因及SOS1基因片断整合进盐芥基因组中。2REALTIMEPCR结果显示,转基因株系在NACL处理条件下SOS1转录水平会发生不同程度的下降。进一步说明SOS1基因的反向重复片段整合到拟南芥的基因组后已正常转录,并引起了SOS1RNA的降解。耐盐生理指标分析表明1在含不同浓度NACL0300MMOL/L的培养基上,SOS1基因的沉默降低了转基因盐芥的耐盐性。2通过比较各个转基因株系之间耐盐性的差异及SOS1转录的水平,发现SOS1转录水平降低越多,盐芥的耐盐性越差。3在用不同浓度的NACL0400MMOL/L处理后,结果表明转基因植株长势明显差于对照。4NA、K含量测定表明,0,200MMOL/LNACL处理下转基因根和地上部分NA的积累显著高于对照,300,400MMOL/LLNACL处理下则差异不是很明显。0400MMOL/LNACL处理后,转基因植株和对照中,根和地上部分K含量均下降,但差异不明显。5在盐胁迫下,对MDA含量的测定表明,野生型植株及转基因植株MDA含量都增加,转基因植株明显高于对照。以上结果表明,盐渍生境下,利用NA外排的策略,降低NA含量,使植物免受过多的伤害,是盐芥耐盐机制的重要组成部分。SOS1的基因沉默降低了盐芥的耐盐性。